637
he article presents data on the determination of the total biological value and toxicity of samples from antlers and a secondary product of dairy production. During the research, it was determined that the samples obtained are non-toxic. The death of Stylonychia mytilus infusoria has not been revealed. It was determined that the best indicators of the total biological value are obtained from a sample of antlers extracted in a subcutaneous serum, the difference with the control reference protein was 2 times.
Maral, antlers, secondary products of dairy production, general biological value, toxicity, Stylonychia mytilus infusoria
Биотестирование это эффективный метод в направлении прикладной биотехнологии по оценке воздействия токсинов на живые организмы. В дополнение к физико-химическим, биохимическим и микробиологическим исследованиям биотестирование позволяет определить влияние исследуемого биоматериала или нового продукта на жизнедеятельность организма. Одним из наиболее часто используемых методов – является тест с инфузориями. Инфузории – это микроскопические одноклеточные организмы, которые обладают уникальными характеристиками, делающими их идеальными для биологической оценки, востребованы из-за своих уникальных характеристик, которые обуславливают рациональность, как при использовании, так и при содержании. Данные методы обладают высокой чувствительностью, к токсическим веществам, надежностью, универсальностью и малой себестоимостью, что очень важно для высокой достоверности полученных результатов [1-4].
Исходя из вышесказанного цель работы являлась применение инфузорий как биотест-объекты для определения общей биологической ценности образцов из пантов марала, экстрагированных вторичными продуктами молочного производства.
Материалы и методы исследований. Научно-исследовательская работа выполнена в отделе ВНИИПО ФГБНУ ФАНЦА в 2023 году. Объектом исследований служили панты марала экстрагированные в поле ультразвука. В качестве экстрагента выступала вторичная продукция молочного производства (пахта, творожная и подсырная сыворотки) при соотношении 1:10 в присутствии протеолитических ферментов. В ходе исследований были получены следующие пробы:
- проба № 1 – панты марала, экстрагированные в сыворотке подсырной;
- проба № 2 – панты марала, экстрагированные в пахте;
- проба № 3 – панты марала, экстрагированные в сыворотке творожной;
- Контроль - эталонный белок (казеин).
Общую биологическую ценность (ОБЦ) полученных проб оценивали с помощью тест-культур инфузорий Stylonychia mytilus, отобрав навеску с концентрацией сырья 0,2%. Меланжером в микроаквариум отбирали суточную культуру инфузорий внося водный раствор исследуемых образцов 20 мкл и повторно подсчитывали особей. Затем в микроаквариум вносили 200 мкл исследуемого образца, из которого готовили среднюю пробу с 0,2% концентрацией протеина. Степень токсичности определяли по гибели: в течение 3 минут происходит гибель инфузорий, то субстрат считается остро токсичным, в течение 10 минут – токсичным и более 3 часов – не токсичен. Спустя 24 часа проводили контроль роста и развития инфузорий. Подсчет инфузорий проводили в камере Горяева с последующим расчетом показателей общей биологической ценности, выраженный как соотношение выросших особей к количеству инфузорий в контрольном белке [5].
Полученные данные были обработаны методами вариационной статистики с использованием программного обеспечения Excel Microsoft Office.
Результаты исследований. Были взяты пробы пантов, экстрагированных в поле ультразвука вторичными продуктами молочного производства. Изучалась динамика роста и развития простейших Stylonychia mytilus в опытных образцах. Результаты представлены на рисунке 1.
Рисунок 1 – Оценка роста Stylonychia mytilus в исследуемых образцах
Исследований показали отсутствие токсического воздействия на культуру микроорганизмов. Это подтверждалось морфологическими характеристиками: подвижностью, отсутствием изменения форм и уровнем выживаемости инфузорий, что указывает об отсутствии токсичности в исследуемых образцах.
Количественный анализ культуры инфузорий показал значительный рост численности клеток по истечению 24 часов (рис. 2).
Рисунок 2 – Количественный анализ Stylonychia mytilus в исследуемых образцах
Изменения концентрации инфузорий во всех пробах имеет вначале одинаковую тенденцию, через 24 часа наблюдается их увеличение. Однако интенсивность этого роста варьировалась в зависимости от состава образцов. В образце, содержащем панты с добавлением подсырной сыворотки, численность инфузорий увеличилась наиболее заметно – в 2 раза по сравнению с контрольной пробой. Образец пантов и творожной сыворотки также привел к значительному росту популяции инфузорий, в 1,8 раза превышающему показатели контрольной группы.
Самой низкой общей биологической ценностью обладает образец из пантов с пахтой, по истечении 24 часов количественный состав инфузорий в полученном образце увеличился всего на 34% по сравнению с эталонным белком (казеином).
Таким образом, полученные результаты биотестирования экстрактов из вторичного продукта молочного производства и пантов доказывают их высокие биологические свойства, что позволяет в дальнейшем их глубокого изучения.
1. Modifikaciya metoda biologicheskoy ocenki pischevyh produktov s pomosch'yu resnichnoy infuzorii tetrahimena piriformis / A. D. Ignat'ev, M. K. Isaev, V. A. Dolgov [i dr.] // Voprosy pitaniya. – 1980. – № 1. – S. 70–71.
2. Sistema kriteriev kompleksnoy ocenki opasnosti himicheskih veschestv, zagryaznyayuschih okruzhayuschuyu sredu / G. N. Krasovskiy, S. L. Avaliani, Z. I. Zholdakova, G.N. Kosyakov // Gigiena i sanitariya. – 1992. – № 9–10. – S. 23–60.
3. RD 118-02-90. Metodicheskoe rukovodstvo po biotestirovaniyu vody. – Moskva, 1991. – 48 s.
4. http://zoo.rin.ru/cgi-bin/index.pl?idr=11&art=63.
5. GOST 31674-2012. Korma, kombikorma, kombikormovoe syr'e. Metody opredeleniya obschey toksichnosti. – Moskva: Standartinform, 2013. – S. 8–23.
